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Vannacutt 菁神病院中发生了一系列恐怖、罪恶的事，所有受害人和医生都已经死亡，这宗阴森、罪恶的事就被掩盖了。但这所建筑记录下了一切。
　　Vannacutt菁神病被关闭的几十年后，有五个人应邀来到这座房子，只要他们能熬过一夜，就能得到一大笔钱。于是漫漫长夜开始了......
　　亿万富翁Steven Price准备在菁神病院里为妻子Evelyn开个特别的生日晚会，当客人们到来时，主人奇怪地发现这五人根本不是受邀请人，而这五人也同样奇怪他们为什么会受到邀请。但是Price还是宣布只要能在这里呆过一晚的人就可以得到钱。他设计了种种可怕的机关，希望客人们能够被吓走，可惜并没有什么效果，菁神病院中真正的恐怖开始了。
　　房子的锁定机关不知为什么突然启动，将所有人关在了里面，人们绝望地寻找着出路……当一晚的恶梦过去后，菁神病院中原来的罪恶和秘密得到揭示......
　　一连串不可思议的疯狂邪恶事件，在「Vannacutt凡纳克菁神疗养院」里默默进行著。长久以来「凡纳克菁神疗养院」都进行著秘密生化试验。在凡纳克博士主持下，研究员以各种药物试验人类所能体会的疯狂极限，不过当年所有的秘密，以及那时的那些牺牲者，研究员与实验药物都已经消失，早已经没有人知道过去发生在《猛鬼屋》中的事情。任何能证明当年凡纳克博士疯狂实验的证据都不复存，现在只剩下荒弃的「凡纳克菁神疗养院」遗址，以及当地人的口耳相传。所有的恐怖秘密都随著《猛鬼屋》的荒废日久为人所遗忘……
　　许多年後，五个不知情的陌生人受邀到《猛鬼屋》中待上一晚，代价是每个人都可以得到美金一百万元做为犒赏，因为对凡纳克博士的恐怖行径一无所知，所以他们本来都深信自己能活著见到明天的太阳，顺利地取得美金一百万元的奖励，哪里知道，猛鬼屋的当夜将会是它们这辈子最漫长的夜晚……
　　为了想要满足他那脑中充满了奇怪扭曲愿望的老婆艾芙琳（芬卡珍森饰），百万富豪主题乐园的显要人物史提夫·布莱斯（杰佛瑞罗许饰），开始筹备他妻子的生日派对时，就突发奇想地想要在废弃的《猛鬼屋》中举行。他不晓得那里就是当年凡纳克博士所留下，在过去曾是许多疯狂生化实验的遗迹。
　　当参加派对的客人们，陆续在傍晚抵达後，史提夫很讶异地发现其中有五个陌生人，他们既非艾芙琳的客人也不是他请来的。史提夫不知道他们从何而来也不知道他们是谁，当然这些客人们对彼此也都一无所知，即使夫妻两人对这五人存有疑问，史提夫仍然和艾芙琳热忱的欢迎他们，而事实上这五人的真正来意也将在之後被证实。史提夫後来宣布，若有人打算在《猛鬼屋》中待上一整夜，只要能幸存就可得到一笔丰厚的赏金，实际上他早在屋子里秘密地安排了一些机关，去惊吓那些前来的挑战者，不过他的诡计很快就证明根本没有意义，因为《猛鬼屋》里就自动地开始发生一些恐怖的怪事。...
　　《猛鬼屋》内深锁的各种机关被重新启动　而且捕获了每个人，这五个向《猛鬼屋》挑战的人，早就忘了原来的一百万元，开始挣扎尖叫不顾一切地向外找活路　。情况其实正像《猛鬼屋》的继承人，原来的屋主华森·布里乔（克里斯克登饰）在事前曾经预言地一般，其实这栋屋子本身就透露出一股邪恶，在这场恶梦结束前，在太阳即将破晓而出的黎明之际，这些绝望的客人们，终将会揭开《猛鬼屋》中最终极的秘密。...